Proteína fluorescente vermelha

Proteína fluorescente vermelha (do inglês Red Fluorescent Protein, RFP) é um fluoróforo que apresenta fluorescências laranja-vermelha quando excitado. Várias variantes foram desenvolvidas usando mutagênese dirigida.^[1] O original foi isolado de Discosoma e denominado DsRed. Outros estão agora disponíveis com fluorescência em laranja, vermelho e vermelho extremo.^[2]

RFP é de aproximadamente 25,9 kDa. O máximo de excitação é 558 nm, e a emissão máxima é 583 nm.^[3]

A primeira proteína fluorescente a ser descoberta, a proteína fluorescente verde (GFP), foi adaptada para identificar e desenvolver marcadores fluorescentes em outras cores. Variantes como a proteína fluorescente amarela (YFP) e a proteína fluorescente ciano (CFP) foram descobertas em Anthozoa.^[4]

Problemas com proteínas fluorescentes incluem o período de tempo entre a síntese de proteínas e a expressão de fluorescência. O DsRed tem um tempo de maturação em torno de 24 horas,^[1] que pode torná-lo inutilizável para muitos experimentos que ocorrem em um período de tempo mais curto. Além disso, o DsRed existe em uma forma tetramérica, o que pode afetar a função das proteínas às quais está ligado. A engenharia genética melhorou a utilidade do RFP, aumentando a velocidade de desenvolvimento fluorescente e criando variantes monoméricas.^[3]^[4]^[5]

DsRed demonstrou ser mais adequado para abordagens de imagens ópticas do que EGFP .^[6]

Referências

↑ ^a ^b Bevis, Brooke J.; Glick, Benjamin S. (2002). «Rapidly maturing variants of the Discosoma red fluorescent protein (DsRed)». Nature Biotechnology (em inglês). 20: 83–87. ISSN 1546-1696. PMID 11753367. doi:10.1038/nbt0102-83
↑ Miyawaki, Atsushi; Shcherbakova, Daria M; Verkhusha, Vladislav V (outubro de 2012). «Red fluorescent proteins: chromophore formation and cellular applications». Current Opinion in Structural Biology. 22: 679–688. ISSN 0959-440X. PMC 3737244 . PMID 23000031. doi:10.1016/j.sbi.2012.09.002
↑ ^a ^b Remington, S. James (1 de janeiro de 2002). «Negotiating the speed bumps to fluorescence». Nature Biotechnology (em inglês). 20: 28–29. PMID 11753356. doi:10.1038/nbt0102-28
↑ ^a ^b Piatkevich, Kiryl D.; Verkhusha, Vladislav V. (2011). «Guide to Red Fluorescent Proteins and Biosensors for Flow Cytometry». Methods in Cell Biology. 102: 431–461. ISBN 9780123749123. ISSN 0091-679X. PMC 3987785 . PMID 21704849. doi:10.1016/B978-0-12-374912-3.00017-1
↑ Bindels, Daphne S; Haarbosch, Lindsay (2017). «mScarlet: a bright monomeric red fluorescent protein for cellular imaging». Nature Methods (em inglês). 14: 53–56. ISSN 1548-7105. PMID 27869816. doi:10.1038/nmeth.4074
↑ Böhm I, Gehrke S, Kleb B, Hungerbühler M, Müller R, Klose KJ, Alfke H (2019). «Monitoring of tumor burden in vivo by optical imaging in a xenograft SCID mouse model: evaluation of two fluorescent proteins of the GFP-superfamily». Acta Radiol. 60: 315–326. PMID 29890843. doi:10.1177/0284185118780896

Ligações externas editar

DsRed em FPBase

[Bevis-1] Bevis, Brooke J.; Glick, Benjamin S. (2002). «Rapidly maturing variants of the Discosoma red fluorescent protein (DsRed)». Nature Biotechnology (em inglês). 20: 83–87. ISSN 1546-1696. PMID 11753367. doi:10.1038/nbt0102-83

[2] Miyawaki, Atsushi; Shcherbakova, Daria M; Verkhusha, Vladislav V (outubro de 2012). «Red fluorescent proteins: chromophore formation and cellular applications». Current Opinion in Structural Biology. 22: 679–688. ISSN 0959-440X. PMC 3737244 . PMID 23000031. doi:10.1016/j.sbi.2012.09.002

[Remington-3] Remington, S. James (1 de janeiro de 2002). «Negotiating the speed bumps to fluorescence». Nature Biotechnology (em inglês). 20: 28–29. PMID 11753356. doi:10.1038/nbt0102-28

[Piat-4] Piatkevich, Kiryl D.; Verkhusha, Vladislav V. (2011). «Guide to Red Fluorescent Proteins and Biosensors for Flow Cytometry». Methods in Cell Biology. 102: 431–461. ISBN 9780123749123. ISSN 0091-679X. PMC 3987785 . PMID 21704849. doi:10.1016/B978-0-12-374912-3.00017-1

[5] Bindels, Daphne S; Haarbosch, Lindsay (2017). «mScarlet: a bright monomeric red fluorescent protein for cellular imaging». Nature Methods (em inglês). 14: 53–56. ISSN 1548-7105. PMID 27869816. doi:10.1038/nmeth.4074

[pmid29890843-6] Böhm I, Gehrke S, Kleb B, Hungerbühler M, Müller R, Klose KJ, Alfke H (2019). «Monitoring of tumor burden in vivo by optical imaging in a xenograft SCID mouse model: evaluation of two fluorescent proteins of the GFP-superfamily». Acta Radiol. 60: 315–326. PMID 29890843. doi:10.1177/0284185118780896

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