Microscópio eletrônico de transmissão: diferenças entre revisões
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Como fixadores de amostras de METs geralmente permitem a rotação de uma amostra em um ângulo desejado, múltiplas visões do mesmo espécime podem ser obtidas pela rotação do ângulo da amostra ao longo de um eixo perpendicular ao feixe. Ao tomar várias imagens MET de uma única amostra em ângulos diferentes, geralmente em incrementos de 1°, um conjunto de imagens conhecido como uma "série de inclinação" (''tilt séries'') podem ser recolhidas. Sob condições puramente de contraste de absorção, esse conjunto de imagens pode ser usado para construir uma representação tridimensional da amostra.<ref name="Frank">{{cite book|editor=Frank, J |title=Electron tomography: methods for three-dimensional visualization of structures in the cell|publisher=Springer|isbn=9780387312347|year=2006|author=Joachim Frank, editor}}</ref>
A reconstrução é realizada por um processo de duas etapas, primeiro as imagens são alinhadas em função dos erros no posicionamento de uma amostra; tais erros podem ocorrer devido à vibração ou movimentação mecânica. Métodos de alinhamento usam algoritmos de [[registro de imagem]], tais como métodos de [[autocorrelação]] para corrigir esses erros. Secundariamente, usando uma técnica conhecida como [[Transformada de Radon#Retroprojeção|retroprojeção filtrada]] (transformada de Radon), as fatias de imagem alinhadas podem ser transformadas de um conjunto de imagens bidimensionais, ''I<sub>j</sub>(x,y)'', em uma única imagem tridimensional, ''I'<sub>j</sub>(x,y,z)''. Esta imagem tridimensional é de particular interesse quando a informação morfológica é necessária, um estudo posterior pode ser realizado utilizando algoritmos de computador, tais como [[isosuperfície]]s (''isosurface'') e fatiamento de dados (''data slicing'') para analisar os dados.<ref name="Frank"/>
Como amostras em METs não podem normalmente ser vistas em uma rotação completa de 180°, as imagens observadas normalmente sofrem de uma "cunha perdida" de dados, as quais quando usando-se métodos de [[teorema da projeção de fatia|retroprojeção baseada em Fourier]] diminui a faixa de freqüências resolúvel na reconstrução tridimensional.<ref name="Frank"/> Técnicas mecânicas, tais como inclinação multi-eixos, bem como as técnicas numéricas existem para limitar o impacto da falta de dados sobre a morfologia do espécime observado. Variantes desse método, designado como [[análise de partícula única]], usa imagens de objetos idênticos múltiplos em diferentes orientações para produzir os dados de imagem requeridos para a reconstrução tridimensional. Assumindo que os objetos não têm orientações preferenciais significativas, este método não sofre com a carga de dados em falta, no entanto, pressupõe que os diversos objetos com imagens podem ser tratadas como se os dados tivessem sido gerados a partir de um único objeto.<ref name="Frank"/>
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