Diagrama de Lineweaver-Burke

A equação de Michaelis-Menten pode ser transformada algebricamente em equações mais práticas para fazer gráficos com dados experimentais. Quando tem valores muito altos, a velocidade inicial aproxima-se assintoticamente a . Na prática, entretanto, é muito difícil obter o valor de com precisão a partir dos gráficos de versus . Mesmo em concentrações tão altas de substrato como , a equação indica que é apenas 91% da de modo que o valor obtido pela extrapolação da assintota será, com toda certeza, subestimado.[1][2]

Uma transformação muito comum é deduzida simplesmente tomando as recíprocas dos dois lados da equação de Michaelis-Menten:

Separando os componentes do numerador no lado direito da equação obtém-se:

que é simplificado para[1][2]

Gráfico duplo recíproco (Lineweaver-Burk)

Essa forma da equação de Michaelis-Menten é um método melhor para determinar os valores de e , que foi formulado por Hans Lineweaver e Dean Burk, sendo a equação denominada Lineweaver-Burk. No caso das enzimas que obedecem a relação de Michaelis-Menten, um gráfico de versus (o “duplo-recíproco” de um gráfico de versus é usado) produz uma linha reta. Essa linha tem uma inclinação de Km/Vmáx no eixo e uma intersecção de no eixo .[1][2]

A representação duplo-recíproca, também denominada gráfico de Lineweaver-Burk, tem a grande vantagem de permitir uma determinação mais acurada de que pode ser obtida apenas aproximadamente nos gráficos simples de versus . No entanto, este gráfico tem uma desvantagem. Uma vez que a maioria das medições experimentais envolve concentrações relativamente altas de , os pontos, portanto, acumulam-se no lado esquerdo do gráfico. Assim, para valores pequenos de , pequenos erros na levam a grandes erros em e, consequentemente, a grandes erros em e .[2]

Outras transformações da equação de Michaelis-Menten são feitas, cada uma com uma vantagem específica para a análise de dados cinéticos. Com o advento dos computadores, entretanto, os dados cinéticos são geralmente analisados por tratamentos estatísticos matematicamente sofisticados.[1]

Contudo, os gráficos de Lineweaver Burk são inestimáveis tanto para a apresentação visual dos dados cinéticos como também são úteis para analisar dados cinéticos de enzimas que usam mais do que um substrato.[1]

O gráfico duplo-recíproco das velocidades de uma reação enzimática é muito útil para diferenciar entre certos tipos de mecanismos de reação enzimática e na análise da inibição de enzimas.[2]

Referências

  1. a b c d e Voet, Donald. Bioquímica. Artmed,2013
  2. a b c d e Princípios de Bioquímica de Lehninger. Nelson, David L. Artmed,2014
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