Sequenciamento de DNA: diferenças entre revisões

O projeto do genoma humano, a necessidade de obter informações genéticas para medicina personalizada, o avanço da tecnologia e outras demandas impulsionaram o desenvolvimento de novas metodologias de sequenciamento com melhor qualidade, menor custo, maior rapidez e maior capacidade de geração de informações.<ref>THERMO FISHER SCIENTIFIC. '''Next-Generation Sequencing (NGS).''' Disponível em: <<nowiki>https://www.thermofisher.com/br/en/home/life-science/sequencing/next-generation-sequencing.html</nowiki>>. Acesso em: 10 abr. 2018.</ref> Esses novos métodos pertencem ao grupo de [https://blog.varsomics.com/ngs/ Sequenciamento de Nova Geração] (NGS, do inglês ''Next-Generation Sequencing''), podendo ser de segunda, terceira ou quarta geração.<ref>MARTINS, Cesar. '''The next generation sequencing.''' Botucatu: Unesp, 2013. Color.</ref> Dentre esses métodos, destacam-se o 454 Roche (pirossequeciamento), o Illumina, o Ion-torrent, o PacBio e o Nanopore.

O [https://blog.varsomics.com/sequenciamento-de-terceira-geracao/ método de PacBio] utiliza uma única molécula de DNA de fita simples que é submetida a replicação por DNA polimerase imobilizada em um micro poço. Durante a replicação, são utilizados nucleotídeos marcados com fluoróforos de diferentes cores. A medida que os nucleotídeos vão sendo incorporados, os fluoróforos são liberados, causando emissão de luz em um comprimento de onda específico. A luz é detectada, e como a adição de cada nucleotídeo resulta em uma fluorescência diferente, é possível identificar a ordem de adição dos nucleotídeos e, portanto, obter a sequência da molécula de DNA. PacBio é considerado uma metodologia de alta acurácia.<ref>PACBIO. '''Smart Sequencing.''' Disponível em: <<nowiki>https://www.pacb.com/smrt-science/smrt-sequencing/</nowiki>>. Acesso em: 10 abr. 2018.</ref>