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Quando o império de Alexandre foi dividido, a cidade ficou sob o controle dos [[selêucidas]] que chamaram a cidade pelo nome de ''Antioquia Mygdonia'' ({{langx|el|Αντιόχεια της Μυγδονίας}}). A cidade foi capturada várias vezes na [[Roma Antiga|era romana]]. Uma delas foi a de [[Lucullus]], após um cerco do irmão de [[Tigranes]] {{dn}} ([[Dião Cássio]], XXXV,6,7) e capturada novamente por [[Trajano]] em {{DC|115|n}} quando ela a denominou ''Parthicus''. Em seguida, perdeu e recuperou a cidade para os [[judeus]] durante a [[segunda guerra judaico-romana| guerra de Kitos]]. Foi perdida em {{DC|194|n}}, mas depois foi reconquistada por [[Septímio Severo]].

Com a nova dinastia dos [[sassânidas]], [[Sapor I]] conquistou ''Nísibis'', foi expulso, e retornou no 260. Em 298, por um tratado com Narseh[[Narses da Pérsia|Narses]], a província de ''Nísibis'' foi adquirida pelo [[Império Romano]]. Em 363, a cidade foi cedida de volta aos persas após a derrota do imperador [[Juliano (imperador)|Juliano]]. Os cidadãos que viviam na cidade foram evacuados em três dias para uma cidade relativamente perto de ''Nísibis'', Amida (atual [[Diabakir]]). ''Nísibis'' teve um bispo assírio cristão, fundado por [[Babu]]{{dn}} (morreu em 309).

Uma nova guerra foi iniciada em [[337]] por [[Sapor II]], que sitiou a cidade em [[338]] , 346 e 350, quando [[Jacó de Nísibis]], o sucessor de Babu, foi seu bispo. ''Nísibis'' era a casa de [[Efrém da Síria|Efrém, o Sírio ]], que permaneceu até sua rendição aos persas em 363 por [[Joviano]]. A cidade tinha uma faculdade de teologia, filosofia e [[medicina]], chamada de [[Escola de Nísibis]], que depois foi fechada quando a cidade foi cedida aos persas. A escola da cidade se tornou um centro do cristianismo nestoriano, até que foi encerrada em 489 pelo arcebispo Ciro.